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分子互作实验RIP(RNA免疫沉淀)

更新时间:2026-07-14点击次数:1838

分子互作实验RIP(RNA免疫沉淀)


一、技艺详细资料

RIP(RNA Immunoprecipitation,RNA免疫系统沉积)系统一种采用理论研究体细胞内RNA与血清质上下级能力的核心检测方式 ,都可以反映RNA根据血清(RBP)在转录后改善中的作用规则。


二、方法作用

RIP回收利用而对指标淀粉酶的抗原把相对应的RNA-淀粉酶塑料物乳浊液加起来,借助提取纯化,对紧密结合在塑料物上的RNA 通过RT-PCR确认或测序概述,可是凸显出生态学学说动力。

分子互作实验RIP(RNA免疫沉淀)

三、广泛解决方法设计

1.基本工作机制:介绍RNA搭配核蛋白(如AGO2、Polycomb黏结物)的功能键及RNA政策调控数据网络。

2.慢性病的研究:对比慢性病与平常范本中RNA-蛋清互作不同,知道未知海洋生物标准物(如胃癌有关于lncRNA)。

3.用药开放:评定用药对RNA-淀粉酶互作的影向,减速靶点建立。


四、技木优势

1.灵活度较高:可探测低丰度RNA与蛋清的细小能够 影响。

2.新动态范围内广:从极少量体细胞(如5×10⁷个)到很复杂进行样版均用于。

3.两组学联用:结合实际RNA-Seq、CLIP-Seq或ChIP-Seq,融合多维改善线上。


五、样品业务类型

新鲜的肿瘤神经細胞系(贴壁肿瘤神经細胞系/悬停肿瘤神经細胞系)、冻存肿瘤神经細胞系、冻存企业、交连后肿瘤神经細胞系样本量。


六、子样本要求

細胞核子样本:约1×10^4个(能够是个10cm皿,或以悬停細胞核主要形式存贮于离心力管上,或个T75瓶);

冻存企业:约70mg;化学热塑生殖神经细胞样板:选用1%甲醛危害化学热塑治理 生殖神经细胞。


七、样例开始准备&公路运输

活血细胞膜膜子样本量:相距较近的可将养在皿/T75瓶/抽滤管中的新鮮血细胞膜膜子样本量常溫包裹(最迟即日达)物流物流运输,北京市内可闪送或亲自递送,相距太远的,可-80℃冻存血细胞膜膜干冰物流物流运输;

组织样本&交联后细胞样本:-80℃冻存干冰运输。


八、需供给的制剂

加测用ChIP级抗体阳性。


九、研究生长期

1-2周(不主要包括测序)


十、许多

事后检查测量选RT PCR时,需具备事后检查测量的位点。

二甲苯热塑神经元系系具体的步聚:①在神经元系系皿里加入终酸度为1%的二甲苯,37℃孵育10秒钟;②的使用含[1mM PMSF,1μg/ml抑肽酶和1μg/ml pepstatin A]的阴冷DPBS洗條神经元系系两三次。③将神经元系系刮入具有蛋清酶促使剂的2ml阴冷的DPBS中,并转交到离心分离管内,冻存邮递。

分子互作实验RIP(RNA免疫沉淀)



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